液相色譜儀維護之關鍵點

  色譜-質譜聯用技術，結合色譜及質譜的技術，是目前分離和鑒定的重要的分析方法之一。其中液相色譜-質譜儀(yi) 應用更為(wei) 廣泛，液相色譜除了能分析一般的化合物，還能分析氣相色譜不能分析的強極性、熱不穩定性、難揮發的化合物。液相色譜質譜儀(yi) 由色譜儀(yi) 、接口、質譜儀(yi) 、電子係統、記錄係統和計算機係統六大部分組成，是一種的檢測儀(yi) 器，儀(yi) 器的良好工作狀態是檢測準確度的一個(ge) 重要影響因子。為(wei) 了保證儀(yi) 器有一個(ge) 良好的狀態，保證檢測結果的可靠性，需要正確合理的使用和維護儀(yi) 器。下麵以質譜儀(yi) 為(wei) 例，從(cong) 儀(yi) 器進樣係統、色譜柱係統、質譜係統等各個(ge) 係統的日常維護保養(yang) 進行詳細闡述，並對使用過程中容易遇到的問題進行分析，提出解決(jue) 方法。

　　液相部分的維護

　　開機注意事項

　　要求使用220 V單相交流電。如發生斷電，不管任何原因造成的，首先關(guan) 閉儀(yi) 器麵板左下角的開關(guan) ，等待供電恢複10分鍾以上再開啟電源，否則有可能燒毀電路板。儀(yi) 器運行時需提供純度>99%的氮氣作為(wei) 噴霧與(yu) 幹燥氣，輸出壓力為(wei) 0.6～0.7 MPa。實驗開始前先檢查液氮罐液體(ti) 存量是否充足。儀(yi) 器開機時，確認電源已經連接而且氣振閥處於(yu) 關(guan) 閉，打開儀(yi) 器總電源，隨後將前麵板左下方的電源按鍵按下，真空泵即開始工作。大約2～3分鍾後，儀(yi) 器內(nei) 置的係統啟動完畢，可以開啟Mass hunter軟件與(yu) 儀(yi) 器通訊。等待四極杆溫度達到100℃，高真空達到4×10-5  Torr之後，即可進行調諧或開始實驗。在儀(yi) 器開始抽真空時，請不要打開前級泵上的氣振閥，否則可能因為(wei) 回油汙染真空腔體(ti) 內(nei) 部。

　　流動相的要求

　　每次開機前，保證超純水和流動相的新鮮，泵的各個(ge) 管路不應餘(yu) 留上次殘留的溶劑。流動相需符合HPLC與(yu) LC-MS要求等級，流動相中盡量加易揮發的鹽，盡量不使用表麵活性劑之類，否則容易導致離子抑製，表麵活性劑產(chan) 生的加合物和離子簇會(hui) 幹擾質譜數據。如果遇到離子抑製，可以把樣品峰往後推或者改變提取方法，或者考慮用APCI源。盡量不使用無揮發性的緩衝(chong) 劑，例如，磷酸緩衝(chong) 劑等，磷酸鹽及其他不揮發緩衝(chong) 鹽在離子源會(hui) 沉澱並堵塞毛細管等。另外液質不能承受過大流速。溶劑瓶避免陽光直射。

　　樣品的要求

　　保證樣品的清潔，進樣前盡量使用0.22 µm的濾膜濾過，避免樣品太髒而堵塞色譜柱或離子源的毛細管;樣品溶劑必須是色譜純，應該和流動相比例一致;進樣濃度不宜太高，因為(wei) 太高濃度的樣品容易汙染靈敏度高的儀(yi) 器，進而影響檢驗結果。由於(yu) 液質的流速較小(ESI一般為(wei) 0.2 mL/min)，所以配置樣品的溶劑強度不能太大，盡量小於(yu) 起始比例，否則，會(hui) 出現保留時間偏移、峰形扭曲等問題。

　　進樣係統的維護

　　對於(yu) 液相色譜來說，無論是手動進樣還是自動進樣，都是使用六通閥進樣的。進樣裝置要求：密封性好，死體(ti) 積小，重複性好，保證中心進樣，進樣時對色譜係統的壓力、流量影響小樣。六通閥使用及維護注意事項：①樣品溶液進樣前必須用0.45 µm濾膜過濾，以減少微粒對進樣閥的磨損。②轉動閥芯時不能太慢，更不能停留在中間位置，否則流動相受阻，使泵內(nei) 壓力劇增，甚至超過泵的限值壓力;再轉到進樣位時，過高的壓力將使柱頭損壞。③為(wei) 防止緩衝(chong) 鹽和樣品殘留在進樣閥中，每次分析結束後應衝(chong) 洗進樣閥。通常可用水衝(chong) 洗，或先用能溶解樣品的溶劑衝(chong) 洗，再用水衝(chong) 洗。注意：溶劑入口過濾芯為(wei) 消耗品，尤其不可以使用超聲清洗，可以使用稀硝酸浸泡，然後用水衝(chong) 洗至中性，以重複使用。

　　色譜柱係統的維護

　　在色譜操作過程中，需要注意下列問題：①色譜柱的選擇會(hui) 直接影響混合物中組分的分離，所以一定要選用合適的色譜柱，在使用新柱前要在自己的液相色譜儀(yi) 上進行性能測試，即使用色譜柱附帶的檢驗報告上測試條件和樣品來測定該色譜柱的柱效，並且在以後的使用中，應時常對色譜柱進行測試。②柱子在使用過程中，不能碰撞、彎曲或強烈震動;避免壓力和溫度的急劇變化，機械震動和溫度的突然變化都會(hui) 影響柱內(nei) 的填充狀況;柱壓的突然升高或降低也會(hui) 衝(chong) 動柱內(nei) 填料，因此在調節流速時應該緩慢進行。③當柱子和色譜儀(yi) 聯結時，閥件或管路一定要清洗幹淨，樣品前處理對於(yu) 柱子使用壽命影響甚大，進樣樣品要提純過濾並且嚴(yan) 格控製進樣量，可以使用保護柱。④注意色譜柱的pH值使用範圍，不能高溫下過長時間使用矽膠鍵和相;每天分析工作結束後，都要用適當的溶劑來清洗柱子。若分析柱長期不使用，應用適當有機溶劑保存並封閉。

　　質譜部分的維護

　　質譜部分的維護一般可以按照以下日程進行：每天衝(chong) 洗樣品通路、清潔噴霧式;每周檢查粗真空泵油的液麵;更換粗真空泵油，檢查軟管、軟線和電纜，清空排汙瓶可以每半年進行一次;另外在日常的試驗中，根據試驗需要清潔機殼，更換噴霧針，清潔或更換整個(ge) 毛細管、分離器及透鏡。重要的是每天衝(chong) 洗係統和清潔噴霧室。毛細管和級錐孔要盡可能潔淨。6個(ge) 月更換機械泵油，需要時更換電子倍增器。

　　錐孔的清潔維護

　　定期清洗一級錐孔，一般兩(liang) 周清洗一次，若進樣數量較大，則盡量一周清洗一次，根據樣品數量多少及時清洗。清洗時將離子源溫度降到室溫，注意關(guan) 閉阻斷閥，旋開固定錐孔的兩(liang) 個(ge) 螺絲(si) ，取下錐孔滴甲酸數滴，浸潤幾分鍾，在甲醇：水為(wei) 50:50溶劑中超聲清洗15分鍾，切記：避免手觸碰到錐孔尖以免影響靈敏度。長期進行一級錐孔的清洗，可相應減少較為(wei) 複雜的二級錐孔、六級杆等的清洗，這些清洗相對複雜，在進行相關(guan) 部件清洗時避免用棉花等擦拭關(guan) 鍵部位，避免殘留的毛絨纖維幹擾儀(yi) 器的靈敏度。

　　粗真空泵的維護

　　真空泵包括需油的回轉泵及無油的渦旋泵，真空泵需注意觀察潤滑油是否出現渾濁或缺油的情況，及時更換潤滑油。泵的油麵宜在2/3處，泵長期運作時每周需要擰開灰色震氣閥按鈕進行半小時震氣，使油內(nei) 的雜物排出，油霧過濾器中的油放回到泵中，然後再擰緊該旋鈕，如果發現油的顏色變深或液麵降至1/2以下，需及時更換並保存更換記錄，注意專(zhuan) 油;無油渦旋泵，也需定期維護，一般半年到一年時更換葉端密封，每天需要震氣。

　　其他附屬設備維護

　　①每天實驗完成之後，使用1:1異丙醇—水溶液清洗或擦洗離子源。注意清洗離子源時請勿將溶液噴入毛細管入口。

　　②當電噴霧噴針被堵塞，針尖破損或觀察到偏離軸的噴射時，就需要更換或調整。

　　③檢查毛細管，鉑金塗層變透明時需要更換，注意檢查毛細管時需要放真空，毛細管兩(liang) 端的鉑金塗層不能用砂紙打磨。

　　④數據係統，需定期備份硬盤數據，進行歸類整理。定期重新啟動機器，將內(nei) 存區域導入閃存，保證數據係統的穩定。

　　質譜儀(yi) 的校準工作，一般宜6個(ge) 月校準一次。注意短時間內(nei) 溫度的急劇變化，其會(hui) 影響質量軸的偏離。

　　常見色譜故障

　　壓力過高

　　壓力過高的原因有很多，但總體(ti) 來講就是一個(ge) 原因，管路堵塞。所以當出現壓力高時候就要分段來檢查哪一段發生堵塞，檢查柱子進口過濾芯是否被汙染，PURGE閥過濾芯是否被汙染或色譜柱被汙染，檢查管路，尤其是針座毛細管，檢查進樣器旋轉密封閥或者進樣針及針座有否堵塞。

　　壓力過低

　　壓力過低總體(ti) 來講一個(ge) 原因就是漏液問題，可能是管路泄露或者泵頭密封墊老化，主動閥、四元出口閥或單向出口閥失靈，另外還要考慮是否色譜柱失效造成固定相流失、溶劑或者流速的改變等因素。注意壓力傳(chuan) 感器之前的某些部件地方堵塞也會(hui) 造成壓力過低。

　　壓力波動

　　液相泵的壓力波動可以從(cong) ripple值看出，1200/1260一般ripple值小於(yu) 2%。如果液相泵的壓力不穩定，會(hui) 影響質譜TIC基線的穩定，並呈規律性變化。造成壓力波動常見的原因就是泵內(nei) 有氣泡。

　　綜上所述，使用液相色譜-質譜儀(yi) 聯用儀(yi) 器的工作人員，在熟練掌握儀(yi) 器操作基礎上，應了解各個(ge) 組成部分的性能，在日常使用中累積經驗，從(cong) 小處著手做好日常維護保養(yang) 工作。如此，才能保證儀(yi) 器的良好狀態，很大程度降低使用維護成本，確保分析結果的準確可靠性，並能降低儀(yi) 器耗損率，延長使用壽命。