高效液相色譜的日常維護注意事項

   高效液相色譜是目前應用較多的色譜分析方法，高效液相色譜係統由流動相儲(chu) 液體(ti) 瓶、輸液泵、進樣器、色譜柱、檢測器和記錄器組成，其整體(ti) 組成類似於(yu) 氣相色譜，但是針對其流動相為(wei) 液體(ti) 的特點作出很多調整。HPLC的輸液泵要求輸液量恒定平穩;進樣係統要求進樣便利切換嚴(yan) 密;由於(yu) 液體(ti) 流動相粘度遠遠高於(yu) 氣體(ti) ，為(wei) 了減低柱壓高效液相色譜的色譜柱一般比較粗，長度也遠小於(yu) 氣相色譜柱。

    和其它分析儀(yi) 器一樣，你若想讓HPLC很好地為(wei) 你工作、得到可靠的數據，首先你要保養(yang) 好它，使它處於(yu) 一個(ge) 良好的待機狀態，這樣你操作它進行分析時就可以比較順利地獲得理想的結果。而且良好規範的操作習(xi) 慣可以延長儀(yi) 器使用壽命。HPLC日常操作注意事項：

1、選擇流動相時應注意的幾個(ge) 問題：

• 盡量使用高純度試劑作流動相，防止微量雜質長期累積損壞色譜柱和使檢測器噪聲增加。

• 避免流動相與(yu) 固定相發生作用而使柱效下降或損壞柱子。

• 試樣在流動相中應有適宜的溶解度，防止產(chan) 生沉澱並在柱中沉積。

• 流動相同時還應滿足檢測器的要求。當使用紫外檢測器時，流動相不應有較強的紫外吸收，一般檢測波長應大於(yu) 流動相的截止波長。

2、泵的維護保養(yang) ：

•  防止任何固體(ti) 微粒進入泵體(ti) ，否則會(hui) 磨損柱塞、密封環缸體(ti) 和單向閥，因此應預先對流動相進行過濾，可采用Millipore濾膜(0．22μm或 0．45μm )等過濾。泵的入口都應該連接砂濾棒(或片)， 輸液泵的濾器應經常更換。

• 流動相不應含有任何腐蝕性物質， 含有緩衝(chong) 液的流動相不應保留在泵內(nei) ， 尤其是停泵過夜或更長時間。分析工作結束後必須用純水充分清洗後，再換成適合於(yu) 色譜柱保存和有利於(yu) 泵維護的溶劑(對於(yu) 反相鍵合固定相，可以是甲醇或甲醇和水)

• 泵工作時要留心防止溶劑瓶內(nei) 的流動相用完，否則空泵運轉也會(hui) 磨損柱塞、密封環或缸體(ti) ，終產(chan) 生漏液。

• 輸液泵的工作壓力不要超過規定的壓力，否則會(hui) 使高壓密封環變形，產(chan) 生漏液。

3、紫外檢測器維護保養(yang) ：

• 流通池進入氣泡會(hui) 幹擾基線，並極難排出，應使用充分脫氣的流動相，以減少氣泡的產(chan) 生。

• 應定期衝(chong) 洗係統，避免流通池幹涸。

• 檢測器中氘燈( 光源) 隨著使用時間的增加，氘燈強度降低，噪音會(hui) 不斷增大，故分析前柱平衡得差不多時，再打開檢測器，分析工作結束及時關(guan) 閉檢測器（頻繁開關(guan) 檢測器也會(hui) 縮短檢測器壽命，一般開啟間隔少於(yu) 4小時，不建議關(guan) 閉檢測器）。 

• 塵埃在靜電的作用下容易覆蓋在光學元件上， 使光傳(chuan) 播效率降低，增加了光散射， 影響分析效果， 因此檢測器周圍的環境應保持清潔。