製備色譜柱的維護方法

一、建議使用保護柱，避免顆粒進入色譜柱，引起堵塞；

二、建議選擇合適pH範圍的色譜柱，避免填料溶劑老化；

三、緩衝(chong) 鹽的正確使用：

緩衝(chong) 鹽通常使用不當會(hui) 析出，堵塞篩板和填料，使填料板結，柱壓升高，阻礙基質上鍵合相的碳鏈自由舒展，使色譜柱保留能力下降，柱效降低，縮短其使用壽命，緩衝(chong) 鹽析出後很難去除，因此正確的使用緩衝(chong) 鹽對延長色譜柱的使用壽命非常重要，具體(ti) 方法如下：

“使用前過渡，使用後衝(chong) 洗！”

1）等度條件：製備前後用過渡流動相衝(chong) 洗柱體(ti) 積不少於(yu) 20-30個(ge) 柱體(ti) 積，或製備完成後用過渡流動相以1.0mL/min（根據柱規格調整）衝(chong) 洗過夜；

2）梯度條件：製備前，用與(yu) 初始流動相組成相同的流動相以工作流速衝(chong) 洗色譜柱不少於(yu) 20-30個(ge) 柱體(ti) 積，製備後，用該過渡流動相衝(chong) 洗色譜柱不少於(yu) 20-30個(ge) 柱體(ti) 積，且梯度盡量平緩，避免緩衝(chong) 鹽析出；

3）過渡流動相：有機相和水相的比例和分析流動相中兩(liang) 相比例一致，或者水相比例高於(yu) 分析流動相，*不含緩衝(chong) 鹽；

四、避免強保留物質在色譜柱保留：

強保留物質在色譜柱中的累積是一個(ge) 緩慢的過程，引起峰變寬和拖尾，使柱效下降，保留時間變化，柱壓長高；對複雜樣品很難判斷其是否含有強保留物質，因此要預防這一切的方式，堅持每天分析完成後用純甲醇或乙腈反向衝(chong) 洗色譜柱20個(ge) 柱體(ti) 積以上。

清洗方法：

1）未使用緩衝(chong) 鹽，每天使用完成後用純甲醇或純乙腈反向衝(chong) 洗色譜柱20個(ge) 柱體(ti) 積以上；

2）使用緩衝(chong) 鹽，用上述方法去除緩衝(chong) 鹽後，用純甲醇或純乙腈反向衝(chong) 洗色譜柱20個(ge) 柱體(ti) 積以上；

3）補救方法：水→乙腈→異丙醇（或氯坊）→乙腈→水，每一步需要衝(chong) 洗不少於(yu) 30個(ge) 柱體(ti) 積。

注意：不要輕易打開柱頭，因為(wei) 柱頭一旦打開，很難恢複到新柱的水平。