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冷凍超薄切片原理和使用
冷凍超薄切片技術是一種為(wei) 了研究更接近於(yu) 生物生活狀態結構和功能而發展起來的電鏡樣品製備技術。它是把樣品進行冷凍固定後,進行超薄切片,省去了經典超薄切片法的長時間的固定、脫水和也埋等處理。下麵給大家介紹冷凍超薄切片機操作,冷凍超薄切片的製備程序可為(wei) 兩(liang) 類,我們(men) 一起看看吧。
1.無溶液製備法:包括取材、快速冷蹤、冷凍替代
、切片、幹燥、染色或不染色、鏡檢等幾個(ge) 步驟。主要用於(yu) 可溶性物質的放射白顯影和X射線微區分析。
2.固定樣品製備法:包括取材、醛類闌定、樣品包埋或不包埋、冷凍保護處IR、快速冷凍切片、染包及鏡檢等步驟。適用於(yu) 進行形態學、細胞化學和免疫細胞化學研究。
用戶經培訓後取得資格可自行使用超薄切片機,使用步驟如下:
1)開機
2)檢查是否處於(yu) 切片模式,檢查頂光底光是否亮度正常;
3)將包埋塊放入適當夾頭並用六角扳手旋緊,以固定包埋塊;(然後將夾頭安裝在修快台進行修快);
4)將夾頭放入機械臂,並用手旋好螺絲(si) 上緊夾頭(不可用六角扳手);
5)將玻璃刀/鑽石刀安裝在刀台上,用手旋好螺絲(si) 以固定刀,並注意檢查刀台是否固定於(yu) 底座上;
6)檢查刀間隙角,調整刀台角,選擇適當的夾頭角度等;
7)設定切片窗口(上下範圍);
8)對刀;
9)選擇所用切片速度和厚度;
10) 在刀槽內(nei) 注水,注意水麵平整;
11) 切片、撈片;
12) 關(guan) 機、清理切片機,拿走個(ge) 人物品,保持切片台麵整潔;
13) 登記使用記錄。