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冰凍切片的原理及其優點
冰凍切片是將新鮮樣品立即在液態氮或其他製冷劑中直接冰凍或者經化學固定後的樣品再冰凍,置於(yu) 低溫下迅速凍結達到一定的硬度後直接進行切片的一種方法。目前,冰凍切片主要用於(yu) 臨(lin) 床病理快速診斷和部分形態學研究性工作中。
了解冰凍切片的原理可以更好地運用在臨(lin) 床病理取材中,也便於(yu) 在臨(lin) 床教學中更好地學習(xi) 與(yu) 實踐。本文就冰凍切片的原理和其優(you) 缺點進行簡單的闡述。
冰凍切片的原理
組織經過冷凍後,其內(nei) 的水分結冰,起到了包埋劑的作用,使組織變硬,有利於(yu) 切成薄片。其過程比較簡單,無需經過脫水和透明步驟,組織經固定或不固定都可切片,一般亦可切成幾微米的薄片。由於(yu) 組織不經溶劑處理,不受試劑的強烈刺激及溫度的影響,所以組織沒有顯著的收縮,細胞形態沒有大的改變,脂肪和類脂也能較好保存。這樣,冰凍切片除了對外科手術中的快速診斷十分有意義(yi) 外,在組織化學、免疫組織化學、免疫定位、原位雜交、酶定位及植物微管研究中也被廣泛地應用。
和其他幾種切片方法相比,冰凍切片有著*性,但也有一定的局限性。
優(you) 點
1)簡便,快速,用時短。在臨(lin) 床上,手術的摘出物需急速診斷時,用此法從(cong) 采取標本到切片製成,可以在15min之內(nei) 完成。切片前可以不需要對組織固定、脫水、透明、包埋等手續即可進行切片,減少了一些中間環節。
2)組織變化不大。能較好地保存脂肪、類脂等成分;在免疫組織化學研究中有利於(yu) 組織抗原性的保存;有些研究為(wei) 了保存某些酶的活性也需要采用此法。特別是對於(yu) 那些對有機溶劑或熱的溫度耐受能力較差的細胞膜表麵抗原和水解酶保存較好。