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多重熒光標記101:基本術語表
揭秘精密係統
生物組織是多類細胞中數千種蛋白質相互作用的結果,這些蛋白質共同保障組織運行正常。多標免疫熒光成像是一種新型技術,能清晰地可視化、識別、量化多種生物標誌物及其在微環境中的分布情況,以便用戶獲取更清晰的目標組織圖像(包括多類細胞及其環境)。
為(wei) 便於(yu) 您了解多標組織成像,我們(men) 整理了一些術語供您參考。

圖1:胰腺癌的多標組織成像分析整體(ti) 解決(jue) 方案顯示六輪四種生物標誌物。右側(ce) 為(wei) 最終的多標組織成像,共顯示了24個(ge) 生物標誌物。

圖2:用Cell DIVE成像的胰腺癌組織切片,顯示4種生物標誌物:SMAC、PCAD、ATP101和LDHA。
自發熒光
生物樣本自然發射的光。自發熒光會(hui) 幹擾生物標誌物成像,將其去除可以提高生物標誌物的信噪(自發熒光)比。去除自發熒光後,分析時隻需考慮真正的陽性生物標誌物即可。
生物標誌物
一種用於(yu) 指示生物來源、特定器官的存在情況,或生理條件或過程;尤其可作為(wei) 評判醫療狀況(易感性)的診斷指標。
染料偶聯抗體(ti)
附著有熒光分子的多克隆或單克隆抗體(ti) ,可用於(yu) 可視化組織。


圖3:30種生物標誌物的表達模型。(左)生物標誌物的細胞圈選。(右)30種生物標誌物的Cell DIVE圖像。
福爾馬林固定的
石蠟包埋(FFPE)組織切片
FFPE是一種保存和製備活檢標本的方式。將組織樣本固定在甲醛中,以保存好組織內(nei) 的蛋白質與(yu) 結構。固定後,將組織嵌入石蠟,以便對組織切片並將其放上玻片。
免疫熒光(IF)
一種依靠抗體(ti) 與(yu) 其抗原相互作用的染色技術。附著熒光標記物(熒光基團)的染料偶聯抗體(ti) 與(yu) 其在細胞內(nei) 的特異性生物分子靶點相結合,以可視化靶分子及其在樣本中的分布情況。
直接免疫熒光——使用可直接結合特定靶點的單一抗體(ti) 。熒光基團專(zhuan) 門與(yu) 抗體(ti) 偶聯。
間接免疫熒光——使用兩(liang) 種抗體(ti) 。一抗與(yu) 特定靶點結合。然後,熒光基團偶聯的二抗與(yu) 一抗結合,可用於(yu) 檢測。
超多標免疫熒光成像
一種免疫熒光技術,用於(yu) 可視化組織微環境中多種抗原的分布情況。使用熒光基團標記的抗體(ti) 探測FFPE組織切片,然後成像,即可去除熒光信號。接下來,再用另外的抗體(ti) 重新探測組織。單個(ge) 圖像被分層,生成組織的完整圖像和所有已探測抗原的定位。
多標表型譜
每種細胞類型均表達有利於(yu) 其功能的特定蛋白質。這些單獨的生物標誌物全部可視化後,有助於(yu) 鑒定組織微環境中的細胞,從(cong) 而構建整個(ge) 組織表型的完整圖像。
單細胞分析
在單細胞層上研究特定生物分子的存在和定位情況。單細胞分析可用於(yu) 研究群體(ti) 內(nei) 的細胞間變異情況(如器官或組織內(nei) )。
空間細胞生物學/
空間生物標誌物分析
研究組織環境中的細胞。空間細胞生物學和生物標誌物分析可用於(yu) 繪製組織內(nei) 細胞及其與(yu) 周圍細胞的相互作用的圖像。
組織/腫瘤微環境
組織結構中各種細胞類型有組織的組合,通過物理、機械和生化機製影響細胞表型。全麵了解腫瘤微環境有利於(yu) 評估癌症進展情況,找出治療癌症的新療法。
寬場顯微鏡
常用於(yu) 多標顯微鏡技術,可將整個(ge) 目標標本暴露在光源之下,從(cong) 而對整個(ge) 視場進行成像。在多標寬場顯微鏡中,建議使用薄標本(單個(ge) 細胞的厚度)進行細胞表型分析。
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