二氧化碳培養箱正確使用方法及日常維護保養

二氧化碳培養(yang) 箱為(wei) 細胞生長提供了理想的生長環境，細胞在培養(yang) 箱中培養(yang) 數月甚至數年，如果培養(yang) 不當導致細胞死亡可能造成極大的科研成果損失。培養(yang) 箱本身性能的穩定和可靠性固然重要，另外，正確的使用方法和日常保養(yang) 對實驗結果也是至關(guan) 重要。

今天為(wei) 大家介紹減少實驗室細胞汙染的三種途徑：

1.正確的使用培訓；

2.持續的日常保養(yang) ；

3.適當的擺放位置。

正確的使用培訓

實驗室內(nei) 往往眾(zhong) 多實驗人員共用一台培養(yang) 箱，難免有人為(wei) 操作失誤，都會(hui) 增大交叉汙染的風險，因此應對所有實驗人員進行培養(yang) 箱的使用培訓。需要注意以下幾點：

設備使用培訓

使用培養(yang) 箱前必須著個(ge) 人防護裝備，按照實驗室生物安全等級要求實施實驗室管理規範、無菌操作方法、標準操作流程（SOP）。

實驗服袖口需紮進手套內(nei) （如圖A），未紮進的袖口可能接觸到潔淨的培養(yang) 基，會(hui) 增加交叉汙染的風險（如圖B），另外裸露皮膚上的可能潛在的汙染源也會(hui) 增加交叉汙染的風險（如圖C）；

手套使用前用70%常用消毒劑消毒；

培養(yang) 瓶、培養(yang) 盤、培養(yang) 皿等在放入培養(yang) 箱前需做好標記；

從(cong) 箱子後部依次往前擺放培養(yang) 基，以免最早放置的被過多幹擾。

近期需要取出的材料放至靠近箱門處並做好標記；

帶蓋的長頸瓶應遠離箱門以避免交叉汙染；

避免堆疊太多培養(yang) 基；

避免幹擾細胞生長盡量少開箱門。

人員操作培訓

建立完善的實驗室管理規範；

新進實驗員應建立培訓流程；

實驗室內(nei) 應定期或不間斷進行操作培訓；

做好詳盡的文件記錄，文件記錄不僅(jin) 單純的記錄實驗室事件，對設備定期維護、實驗數據查找都能起到很好的提示和記錄，比如提示每周檢查過濾器、記錄開門頻率對細胞生長的影響。

持續的日常維護保養(yang)

培養(yang) 箱日常維護保養(yang) 對其性能的保障非常重要，甚至比操作技術失誤對實驗結果的影響更大。做好培養(yang) 箱的日常維護不僅(jin) 減少對實驗結果的影響更能延長培養(yang) 箱的使用壽命，降低實驗室成本。

完善的文件管理

廠商提供的操作維護說明書(shu) 是很好的參考文件，會(hui) 列舉(ju) 日常使用及保養(yang) 需注意的要點，可以作為(wei) 實驗室培養(yang) 箱維護文件的參考。製定維護保養(yang) 文件時需全麵考慮培養(yang) 箱使用頻率、實驗室環境潔淨度、使用人員的數量、以及培養(yang) 細胞的類型等，綜合各方麵情況列出合理的方案。

箱體(ti) 的定期清潔

培養(yang) 箱內(nei) 外部的定期清潔頻率取決(jue) 於(yu) 培養(yang) 細胞的類型和實驗室環境。

外部清潔必須定期去除灰塵及長期附著在表麵的汙染物，這些汙染物在開門時很可能隨空氣流動潛入箱體(ti) 內(nei) 。培養(yang) 量大的實驗室建議每周清潔一次，培養(yang) 量小的實驗室建議每月清潔一次。使用較溫和的家用清潔劑或蒸餾水清潔即可。

不鏽鋼內(nei) 膽建議每月清潔一到兩(liang) 次，圓角的設計（圖D）可以減少汙染物的產(chan) 生，可使用70%異丙醇、酒精或其它無腐蝕性的消毒劑擦拭，切記不可使用鹵素類消毒劑（次氯酸、漂白粉）。門口墊圈處（圖E）很易滋生汙染物，需注意加強清潔，或拆下進行高溫滅菌。

水盤的清潔

水盤的清潔和換水是培養(yang) 箱日常維護很重要的項目，至少一周需清潔一次，頻繁加水以保障飽和濕度。水盤加水使用蒸餾水或去離子水，可以加少劑量的硫酸銅溶液抑製汙染物。

防止幹燥

如果培養(yang) 環境濕度不足，培養(yang) 基中的水分會(hui) 蒸發造成環境幹燥影響細胞生長。至少每周加一次水對保持培養(yang) 箱濕度非常重要。

汙染風險降低

細菌、黴菌、病毒或支原體(ti) 汙染是細胞生長最大的威脅。現代的培養(yang) 箱的設計和特點可以適當減少汙染發生。

HEPA過濾器

閉環HEPA過濾器是減少汙染發生的一個(ge) 重要設計。HEPA過濾器持續提供箱內(nei) 潔淨的空氣。但為(wei) 保證HEPA過濾的有效性，HEPA需要定期更換，每周或每兩(liang) 周應定期檢查過濾器。進氣過濾器（圖F）的壽命一般在3-6個(ge) 月。NuAire建議供氣過濾器（圖G）每使用5瓶氣或已變黃時更換一次，大的囊性過濾器（圖H）每兩(liang) 年需更換一次。

配備HEPA過濾器的培養(yang) 箱類似一個(ge) 微型潔淨間，箱內(nei) 持續過濾的空氣使箱體(ti) 空氣潔淨度達到百級。每一次開箱門都可能造成汙染物的侵襲，NuAire培養(yang) 箱每20分鍾換氣一次，使汙染物快速被過濾，箱體(ti) 內(nei) 空氣潔淨度達ISO 5級。

循環滅菌

一些實驗室潛在病原微生物如HIV病毒，需要145℃幹熱循環滅菌才能有效滅殺。145℃滅菌程序需要持續8-14小時，可選擇在夜間運行。NuAire培養(yang) 箱的層架和內(nei) 部五金件耐受145℃滅菌，無需滅菌前取出，節約了滅菌時間。

145℃滅菌需要按照實驗室SOP根據實際需要運行，並且不能代替日常的清潔保養(yang) 。

放置適當位置

培養(yang) 箱需要放置在實驗室內(nei) 合適的位置：需遠離走廊，環境溫度需穩定，遠離水源，遠離通氣設備以免空氣汙染，遠離窗口避免陽光直射，遠離其它熱源如高壓蒸汽滅菌器，以及離電源近的位置。